技術(shù)文章
Technical articles血小板疾病動(dòng)物模型小鼠血小板減少性紫癜模型(1)復(fù)制方法體重約為20g,年齡為8周齡的BALB/c小鼠。抗原制備:BALB/c小鼠經(jīng)乙丨醚麻醉后,眼球摘除取血(EDTA-Na2抗凝),分離血小板并洗滌,用生理鹽水稀釋。免疫:取已準(zhǔn)備好的血小板分別與等量弗氏佐劑和不弗氏佐劑混合成油包水狀作為抗原。取含有弗氏佐劑的抗原于0周注射于豚鼠足掌、背及腹部皮下,每次至少4點(diǎn),第5周豚鼠心臟取血(不抗凝)。560r/min,離心10min,取上清,得到豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS),...
1白細(xì)胞減少癥動(dòng)物模型(Animalmodelofleucopenia)在研究化療藥物毒性的減毒實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)常需要建立化療所致的白細(xì)胞減少癥及骨髓有核細(xì)胞減少癥的動(dòng)物模型。白細(xì)胞減少癥(leucopenia)為臨床常見血液病。凡機(jī)體外周血液中白細(xì)胞數(shù)持續(xù)低于4×1000000000/L時(shí),稱之為白細(xì)胞減少癥;若機(jī)體白細(xì)胞總數(shù)明顯減少,低于2×1000000000/L,中性粒細(xì)胞值低于0.5×1000000000/L甚至消失者,則稱為粒細(xì)胞缺乏癥(agranulocysis)。臨...
慢性移植物抗宿主病狼瘡小鼠模型(1)復(fù)制方法體重為16g左右、年齡為6~8周齡的(雌性DBA/2×雄性C57BL/6J)F1代小鼠,通過尾靜脈注射其母鼠DBA/2淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)模型,觀察12周。先麻醉處死DBA/2小鼠,無菌分離其脾臟、胸腺、淋巴結(jié),比例為3:2:1,將所取組織在生理鹽水中研磨,過150μm和70μm尼龍篩,鏡下觀察細(xì)胞存活狀況,并計(jì)算細(xì)胞數(shù)量。將制備好的淋巴液活細(xì)胞經(jīng)F1代鼠尾靜脈注入體內(nèi),注射劑量為每只鼠50×1000000個(gè)淋巴液活細(xì)胞,注射時(shí)間分別為0、...
(1)復(fù)制方法體重1.5kg左右的雌性新西蘭兔,經(jīng)耳緣靜脈按8.0×10的-2次方g/kg體重的劑量一次性注射環(huán)磷酰胺溶液,6h后,用0.1%苯扎溴銨(新潔爾滅)消毒兔陰丨門附近皮膚,無菌條件下行膀胱導(dǎo)尿插管,用注射器吸盡尿液,抽取含1000000個(gè)/ml大腸桿菌的培養(yǎng)液1ml,經(jīng)導(dǎo)尿管注入膀胱內(nèi),拔出插管。動(dòng)物自由飲水和進(jìn)食,24h后,觀察動(dòng)物排尿頻率,記錄12h內(nèi)的排尿次數(shù);同時(shí)采血作血涂片,鏡下觀察和計(jì)數(shù)白細(xì)胞。經(jīng)耳緣靜脈注射空氣處死實(shí)驗(yàn)兔,手術(shù)剖開腹腔與盆腔,暴露膀胱...
膀胱梗阻動(dòng)物模型(1)復(fù)制方法體重2.5~3kg的雄性新西蘭兔,經(jīng)靜脈按10mg/kg體重的劑量注射苯丨巴丨比丨妥麻醉,然后將動(dòng)物仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上,暴露腹部手術(shù)區(qū),從陰莖插入F8導(dǎo)尿管,下腹部手術(shù)區(qū)常規(guī)消毒和去毛。取恥骨上正中切口,切開皮膚,鈍性加銳性分離腹肌,進(jìn)入盆腔并分離膀胱,從膀胱頸部后緣鈍性分離至對(duì)側(cè);以1號(hào)絲線結(jié)扎膀胱頸,拔除導(dǎo)尿管,關(guān)閉手術(shù)切口。動(dòng)物術(shù)后當(dāng)天開始用慶大霉素1萬U/kg體重肌肉注射7d。動(dòng)物后常規(guī)飼養(yǎng)及觀察。術(shù)后5周經(jīng)靜脈以苯丨巴丨比丨妥10mg/...
肛門閉鎖動(dòng)物模型(1)復(fù)制方法體重為200~220g雌性成年大鼠與雄性大鼠隔夜同籠飼養(yǎng)交配,于次日晨檢查交配后雌鼠陰栓脫落情況并作陰道涂片,將發(fā)現(xiàn)陰栓日定為妊娠第1日,然后單籠飼養(yǎng)。在妊娠10~12d時(shí)稱重,將1%乙烯硫脲溶液按125mg/kg體重的劑量灌服孕鼠。待母鼠妊娠滿20d時(shí),頸椎脫臼處死動(dòng)物,剖腹取出子宮內(nèi)胎仔,測(cè)量其身長(zhǎng)及體重,觀察并記錄胎仔外觀形狀。然后用生理鹽水處死,將其軀干筆直固定于10%甲醛溶液中,對(duì)胎仔整體正中矢狀連續(xù)切片,光鏡下觀察。即可發(fā)現(xiàn)有不同類型...
妊娠肝內(nèi)膽汁淤積癥動(dòng)物模型(1)復(fù)制方法體重為220g的雌性成年大鼠與雄性大鼠隔夜同籠飼養(yǎng)交配,次日早晨觀察交配后陰栓脫落情況,將發(fā)現(xiàn)陰栓日定為妊娠第1日,然后單籠常規(guī)飼養(yǎng),自由飲水及進(jìn)食。于妊娠第16日,經(jīng)頸后按5mg/kg體重的劑量皮下注射苯甲酸雌二醇,連續(xù)5d。給藥后孕鼠肝臟出現(xiàn)肝細(xì)胞排列紊亂,肝細(xì)胞腫脹及肝竇狹窄,部分肝細(xì)胞發(fā)生脂肪變性,有的肝細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有膽汁樣物質(zhì)。同時(shí)孕鼠的膽汁分泌量明顯減少,膽汁流速明顯降低;其血清中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅紊、膽酸含量顯著升高。待...
胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)遲緩動(dòng)物模型1子宮動(dòng)脈結(jié)扎模型(1)復(fù)制方法雌性成年大鼠與雄性大鼠隔夜同籠飼養(yǎng)交配,次日早晨觀察交配后陰栓脫落情況,將發(fā)現(xiàn)陰栓日定為妊娠第1日,然后單籠常規(guī)飼養(yǎng),自由飲水及進(jìn)食。于妊娠第17日進(jìn)行手術(shù)結(jié)扎子宮子宮角動(dòng)脈。經(jīng)腹腔按30mg/kg體重的劑量戊丨巴丨比丨妥丨鈉注射麻醉。麻醉后將小鼠仰臥固定于手術(shù)板上,腹部常規(guī)消毒皮膚并脫毛。鋪無菌紗布,沿下腹正中作縱向切口,暴露子宮并用溫生理鹽水紗布保護(hù)子宮,尋找分離子宮角動(dòng)脈,在動(dòng)脈結(jié)扎處并行置一0號(hào)鋼絲,一并結(jié)扎子宮...